Thèse Caractérisation des Interactions Sras-Cov-2 - Système Rénine-Angiotensine-Aldostérone pour de Nouvelles Approches Thérapeutiques dans la Prise en Charge de la Covid-19 H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université de Toulouse École doctorale : BSB - Biologie, Santé, Biotechnologies Laboratoire de recherche : I2MC - Institut des Maladies Métaboliques et Cardiovasculaires Direction de la thèse : Céline GALES ORCID 0000000249381583 Début de la thèse : 2026-10-01 Date limite de candidature : 2026-05-29T23:59:59 SRAS-CoV-2 (CoV-2) est l'agent de la COVID-19. Malgré de nombreux travaux, les mécanismes de la pathogénicité de CoV-2 restent mal connus. Le virus infecte les cellules via la liaison de sa protéine S à ACE2, une enzyme qui régule le système Renine-Angiotensine-Aldosterone (SRAA) en dégradant AngII, le ligand du récepteur AT1 (AT1R). Dans ce projet, nous étudierons des mécanismes qui conduiraient CoV-2 à moduler le SRAA, contribuant ainsi aux complications cardiovasculaires et pulmonaires dans les formes graves de la COVID-19. Nous pensons que le virus lui-même influence le SRAA. In vitro et in vivo, nous rechercherons si le domaine spike du virus modifie le complexe ACE2/AT1R et la fonction de ces récepteurs. Nous étudierons enfin la possibilité de cibler ces effets comme nouvelles options de traitement de la COVID-19. Dans ce contexte, le projet de thèse, en collaboration avec le Dr B. Lagane (INFINITY-Toulouse), spécialiste en virologie, consistera à :
1/Caractériser l'interaction AT1-R/ACE2 et étudier l'impact allostérique de l'interaction de l'ACE2 sur :
la pharmacologie de l'axe cardiodélétère Ang II/AT1-R/Gq (activation Gq, production d'IP1)
la pharmacologie de l'axe cardioprotecteur Ang1-7/AT1-R/-arrestine 2 et Ang 1-7 antagoniste AT1-R/Gq (internalisation ACE2/AT1-R, expression AT1-R et ACE2 à la surface cellulaire, recrutement/affinité de la -arrestine).
2/Caractériser l'interaction AT1-R/ACE2 et étudier l'impact allostérique de l'interaction de l'ACE2 sur la pharmacologie du système AT1-R mais en conditions mimant une infection au SRAS-Cov-2. Pour cela, les mêmes expériences que précédemment seront réalisées mais après fixation de la glycoprotéine d'enveloppe du SRAS-Cov-2 sur l'ACE2.
3/ Etudier in vivo, avant et après infection au SRAS-Cov-2, les niveaux d'expression d'ACE2 et AT1-R cardiaque chez des souris saines ou présentant une insuffisance cardiaque diastolique à fraction d'éjection préservée (modèle de souris-ACE2 humanisées / hamster) qui semble représenter un facteur de comorbidité important chez les patients atteints du COVID-19.
Hypothèse de travail. Nous faisons l'hypothèse que les complications associées au SRAS-Cov-2 pourraient provenir, entre autres, d'une dérégulation du système AT1-R via son interaction avec ACE2, récepteur utilisé par le virus pour entrer dans les cellules.
Dans ce contexte, le projet de thèse, en collaboration avec le Dr B. Lagane (INFINITY-Toulouse), spécialiste en virologie, consistera à :
1/Caractériser l'interaction AT1-R/ACE2 et étudier l'impact allostérique de l'interaction de l'ACE2 sur :
la pharmacologie de l'axe cardiodélétère Ang II/AT1-R/Gq (activation Gq, production d'IP1)
la pharmacologie de l'axe cardioprotecteur Ang1-7/AT1-R/-arrestine 2 et Ang 1-7 antagoniste AT1-R/Gq (internalisation ACE2/AT1-R, expression AT1-R et ACE2 à la surface cellulaire, recrutement/affinité de la -arrestine).
2/Caractériser l'interaction AT1-R/ACE2 et étudier l'impact allostérique de l'interaction de l'ACE2 sur la pharmacologie du système AT1-R mais en conditions mimant une infection au SRAS-Cov-2. Pour cela, les mêmes expériences que précédemment seront réalisées mais après fixation de la glycoprotéine d'enveloppe du SRAS-Cov-2 sur l'ACE2.
3/ Etudier in vivo, avant et après infection au SRAS-Cov-2, les niveaux d'expression d'ACE2 et AT1-R cardiaque chez des souris saines ou présentant une insuffisance cardiaque diastolique à fraction d'éjection préservée (modèle de souris-ACE2 humanisées / hamster) qui semble représenter un facteur de comorbidité important chez les patients atteints du COVID-19.

- Biologie cellulaire: Culture cellulaire, transfection (transitoire et stable) sur modèles cellules immortalisées.
- ELISA: Détection/quantification des RCPG à la surface cellulaire.
- Imagerie: Microscopie confocale (immunofluorescence), FRET.
- Techniques Biophysiques de Transfert d'énergie par résonance (BRET/FRET): ces techniques sont la spécialité de notre laboratoire et seront utilisées pour mesurer directement des interactions entre récepteurs et protéines G en temps réel dans les cellules vivantes mais également pour visualiser et localiser ces événements moléculaires au niveau des compartiments subcellulaires spécifiques (BRET microscopie, FRET bio-senseurs).
- Quantification de production de II messagers : cAMP, IP1 (HTRF-time-resolved FRET)
- Biochimie : Immunoprécipitation de protéines, Western blot, purification des micro-domaines rafts sur gradient de sucrose.
- qPCR
- Expériences in vivo (souris) : évaluation des paramètres de la fonction cardiaque

Master 2 Recherche
Bases solides en biologie moléculaire et cellulaire et biochimie.
Grande motivation